721型分光光度計允許的測定波長范圍在360~800nm,其構(gòu)造比較簡單,測定的靈敏度和精密度較高。因此,應(yīng)用比較廣泛。
從光源燈發(fā)出的連續(xù)輻射光線,射到聚光透鏡上,會聚后,再經(jīng)過平面鏡轉(zhuǎn)角90°,反射至入射狹縫。由此入射到單色器內(nèi),狹縫正好位于球面準(zhǔn)直物鏡的焦面上,當(dāng)入射光線經(jīng)過準(zhǔn)直物鏡反射后,就以一束平行光射向棱鏡。光線進入棱鏡后,進行色散。
色散后回來的光線,再經(jīng)過準(zhǔn)直鏡反射,就會聚在出光狹縫上,再通過聚光鏡后進入比色皿,光線一部分被吸收,透過的光進入光電管,產(chǎn)生相應(yīng)的光電流,經(jīng)放大后在微安表上讀出。
721型分光光度計波長的選擇
波長的選擇一般是選擇待測物質(zhì)最大吸收峰的波長(λmax)。因在λmax測定吸光度,敏感度最高。在吸收峰波長處測吸光度,波長變化影響最小;而在其他波長處,波長變化對吸光度影響大,甚至測得濃度一吸光度曲線不呈直線。
選擇測定某一溶液所需的波長,是可以用不同的波長作該溶液的吸收光譜曲線,從曲線上選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL來進行這一溶液的測定工作,但是,在分析工作中,尚有個別情況,不能單憑此一原則,而應(yīng)根據(jù)下列三個原則,進行實際試測,然后全面考慮利弊,再行選定。
1.應(yīng)使被測溶液有適當(dāng)?shù)墓饷芏龋话愣?,適當(dāng)?shù)墓饷芏葹?.1—0.7,而以0.2—0.6理想。過低的光密度因儀器的讀數(shù)誤差而產(chǎn)生很大的相對誤差,反之,過高的光密度則往往已超過直線范圍而引入誤差。
2.應(yīng)使干擾影響降低至低限度。在反應(yīng)中,如遇不易去除的干擾色澤,應(yīng)選用對此干擾色澤最不靈敏的波長。
3.應(yīng)使標(biāo)準(zhǔn)曲線在盡可能大的范圍內(nèi)接近直線。
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